√资源天堂中文在线丨黄色一级网丨少妇饥渴xxhd天美xxhd丨99精产国丨欧美成人精品视频在线不卡丨狠狠综合久久久久综合网站丨最近免费中文字幕中文高清百度丨中文在线www天堂网丨免费无码黄动漫在线观看丨99这里有精品视频视频丨久久久99国产精品免费丨黄色大全在线观看丨5678少妇影院丨成人性生交视频免费观看丨国产无套粉嫩白浆内谢在a丨久久国产主播福利在线丨欧洲精品久久久av无码电影丨亚洲国产良家在线观看丨欧美人与物videos另类丨人妻少妇88久久中文字幕丨日本真人做爰免费视频120秒丨国内精品九九久久精品丨av一卡二卡丨欧美视频网址丨成 人 黄 色 片 在线播放

歡迎訪問上海恒遠生物科技有限公司網站

當前位置:主頁 > 技術文章 > 恒遠十年資深技術與您分享“WB內參抗體選擇原則”

技術文章

Technical articles
恒遠十年資深技術與您分享“WB內參抗體選擇原則”
更新時間:2014-10-21 點擊次數:2364

內參抗體種類很多,比如β-actinβ-tubunlinGAPDHLamin B等,那么針對自己的實驗,我們該如何選擇呢?下面恒遠技術簡單介紹下選擇內參抗體應遵循的原則:

.樣本種屬來源:

首先要考慮的就是實驗樣本來源于什么物種。

1、哺乳動物的組織或者細胞樣本,通常選擇β-actinβ-tubulinGAPDHLamin BHistone H3Na,K atpase等。

2、植物來源實驗樣本,則可以選擇plant actinRubisco等。

3、其他來源樣本研究較少,所以就應該參照文獻報導,選擇合適的蛋白作為內參。

.目的蛋白分子量:

選擇內參抗體時,應該考慮目的蛋白分子量的大小。通常應該保證目的蛋白與內參蛋白分子量相差5KD以上。比如目的蛋白分子量為45KD,此時不適宜選擇β-actin作為內參,可以考慮選擇GAPDH或者β-tubulin作為內參。

.目的蛋白表達部位:

就一般的蛋白檢測來說,β-actinβ-Tubulin抗體等就可以了,而針對于核蛋白的定量,特別是樣本蛋白就是核蛋白時,選擇恰當的核蛋白內參則更能體現內部參照的價值。常用的核內參抗體有Lamin ALamin BHistone H3,除此之外,其它常見的核蛋白內參還有PCNAK70K80等,在一些文獻報道中,Erk2TATA binding protein(TBP)以及c-Junc-Fos等都有使用。而對于膜蛋白檢測,常用的內參抗體為Na,K ATPase。對于線粒體蛋白的檢測,常用VDAC1COX IV作為內參抗體。

以上幾條原則只是針對通常情況,但是需要注意的問題是——內參的選擇需要考慮實際的試驗環境,比如某些細胞中,由于組織缺氧、糖尿病等因素會導致GAPDH的表達增高,不適合做內參。比如在涉及細胞增殖相關試驗中,c-Jun由于自身表達變化就不適合做內參;而在凋亡實驗時,TBPLamin等也不適合作為內參。因此設計實驗方案的時候應該考慮這些因素并查詢相應文獻,在實驗過程中也應該注意如果內參表達出現異常,應考慮這方面因素。

版權所有 © 上海恒遠生物科技有限公司 備案號:滬ICP備11004148號-3 技術支持:化工儀器網 管理登陸 sitemap.xml

在線客服 聯系方式

服務熱線

13564766906

19821325306

掃一掃,添加微信

化工儀器網

推薦收藏該企業網站